1. COLLAB UVV
  2. Teses e Dissertações
  3. Pós-Graduação em Biotecnologia Vegetal
  4. Dissertação de Mestrado
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dc.contributorFronza, Marcio-
dc.contributorAragão, Victor Paulo Mesquita-
dc.contributor.authorCelestino, Mariana Magalhães Marchesi Ribeiro-
dc.date.accessioned2023-12-08T15:29:18Z-
dc.date.available2023-12-08T15:29:18Z-
dc.date.issued2023-10-26-
dc.identifier.urihttps://repositorio.uvv.br//handle/123456789/1021-
dc.description.abstractA técnica de cultura de tecidos e células vegetais in vitro representa uma valiosa ferramenta no contexto da produção sustentável de metabólitos secundários. Esta abordagem permite a criação de condições controladas, e ao empregar elicitores, é possível estimular rotas biossintéticas visando a otimização da produção de metabólitos primários e secundários de interesse à saúde humana. Neste contexto, apesar do café destacar-se pela sua riqueza de compostos bioativos, até o momento, não foram conduzidos estudos que descrevam o uso dos elicitores Espermidina (Spd) e Metil jasmonato (MJ) para incrementar a síntese de metabólitos primários e secundários em culturas in vitro da espécie C. canephora. Portanto, o objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos dos elicitores Spd e MJ na produção de metabólitos bioativos com potencial atividade antioxidante, anti-inflamatória e cicatrizante em cultura de calos derivados de folhas de C. canephora. Folhas do clone 501 foram submetidas a indução de calos e elicitados com Spd e MJ nas concentrações de 100 e 200 µM. Os extratos dos calos de C. canephora (ECCC) foram analisados quanto ao teor de compostos fenólicos, flavonoides e proteínas totais. A atividade antioxidante dos extratos foi determinada pelos ensaios químicos do ABTS, DPPH e FRAP. A atividade anti-inflamatória in vitro foi investigada em cultura de macrófagos RAW 264.7 estimulados com lipopolissacarídeos (LPS) pela inibição da produção de óxido nítrico (NO), ânion superóxido (O2●-), fator de necrose tumoral (TNF-α) e interleucina-6 (IL-6). Os efeitos sobre a proliferação e migração de fibroblastos foram avaliados pelos ensaios BrDU e scratch assay, respectivamente. Os resultados evidenciaram que os extratos elicitados tiveram um teor de proteínas superior ao não elicitado (controle), destacando os extratos elicitados com Spd e MJ 200 µM (371,1 ± 0,4 e 384,1 ± 1,4 mg/100g de extrato, respectivamente). Os maiores teores de fenólicos (532,44 ± 1,94 mg/100g) e flavonoides (208,74 ± 36,07 mg/100g) foram obtidos após elicitação com MJ 200 µM, comparados ao grupo controle sem elicitor. A atividade antioxidante observada para o extrato elicitado com MJ 200 µM no ABTS, DPPH e FRAP apresentou valores de IC50 de 7x, 9x e 8x inferiores, respectivamente, comparados ao grupo controle sem elicitor. Todos os ECCC promoveram a proliferação e migração de fibroblastos e apresentaram a capacidade de suprimir os mediadores pró inflamatórios NO, O2●, TNF-α, e IL-6 de forma dose-dependente, com destaque para o ECCC testado na concentração de 100 µg/mL e elicitado com MJ 200 µM. Portanto, os resultados deste estudo indicam, pela primeira vez, que a elicitação com Spd e MJ em culturas de calos de C. canephora revelou-se como uma estratégia promissora para a produção de metabólitos bioativos com potencial antioxidante, anti-inflamatório e cicatrizante. Esses achados contribuem para o desenvolvimento de estratégias sustentáveis na produção de metabólitos secundários com benefícios à saúde humana.pt_BR
dc.language.isopt_BRpt_BR
dc.subjectCultivo in vitropt_BR
dc.subjectCélulas-troncopt_BR
dc.subjectCafépt_BR
dc.subjectCalogênesept_BR
dc.subjectElicitorespt_BR
dc.subjectBioativospt_BR
dc.subject.vocabularyCNPQ::CIENCIAS BIOLOGICASpt_BR
dc.titleEfeito dos elicitores espermidina e metil jasmonato na cultura de calos de Coffea canephora sobre a produção de metabólitos bioativos com potencial atividade antioxidante, anti-inflamatória e cicatrizantept_BR
dc.typeDissertationpt_BR
dc.publisher.countrybrasilpt_BR
dc.description.resumoThe in vitro tissue and plant cell culture technique represents a valuable tool in the context of sustainable production of secondary metabolites. This approach allows the creation of controlled conditions, and by employing elicitors, it is possible to stimulate biosynthetic routes aiming to optimize the production of primary and secondary metabolites of interest to human health. In this context, although coffee stands out for its richness of bioactive compounds, to date, no studies have been conducted describing the use of the elicitors Spermidine (Spd) and Methyl jasmonate (MJ) to increase the synthesis of primary and secondary metabolites in in vitro cultures of the species C. canephora. Therefore, the objective of this study was to evaluate the effects of Spd and MJ elicitors on the production of bioactive metabolites with potential antioxidant, anti-inflammatory and healing activity in callus cultures derived from C. canephora leaves. Leaves of clone 501 were subjected to callus induction and elicited with Spd and MJ at concentrations of 100 and 200 µM. Extracts from C. canephora callus (ECCC) were analyzed for the content of phenolic compounds, flavonoids and total proteins. The antioxidant activity of the extracts was determined by chemical assays of ABTS, DPPH and FRAP. The in vitro anti-inflammatory activity was investigated in cultures of RAW 264.7 macrophages stimulated with lipopolysaccharides (LPS) by inhibiting the production of nitric oxide (NO), superoxide anion (O2●-), tumor necrosis factor (TNF-α) and interleukin-6 (IL-6). The effects on fibroblast proliferation and migration were evaluated by the BrDU and Scratch assay, respectively. The results showed that the elicited extracts had a higher protein content than the non-elicited (control), highlighting the extracts elicited with Spd and MJ 200 µM (371.1 ± 0.4 and 384.1 ± 1.4 mg/100g of extract, respectively). The highest levels of phenolics (532.44 ± 1.94 mg/100g) and flavonoids (208.74 ± 36.07 mg/100g) were obtained after elicitation with MJ 200 µM, compared to the control group without elicitor. The antioxidant activity observed for the extract elicited with 200 µM MJ in ABTS, DPPH and FRAP presented IC50 values of 7x, 9x and 8x lower, respectively, compared to the control group without elicitor. All ECCC promoted the proliferation and migration of fibroblasts and showed the ability to suppress the pro-inflammatory mediators NO, O2●-, TNF-α, and IL-6 in a dose-dependent manner, with emphasis on the extract tested at a concentration of 100 µg/mL and elicited with 200 µM MJ. Therefore, the results of this study indicate, for the first time, that elicitation with Spd and MJ in C. canephora callus cultures proved to be a promising strategy for the production of bioactive metabolites with antioxidant, anti-inflammatory and healing potential. These findings contribute to the development of sustainable strategies for the production of secondary metabolites with benefits for human health.pt_BR
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