COLLAB UVV

1. COLLAB UVV
2. Teses e Dissertações
3. Ciências Farmacêuticas (Dissertações)

Title:	Análise de genotoxicidade em células - tronco hematopoiéticas da medula óssea de camundongos
Authors:	Ceschim, Sara Lopes
metadata.dc.contributor:	Campagnaro, Bianca Prandi
Keywords:	Envelhecimento - Ânion superóxido - Estresse oxidativo - Danos ao DNA - Ensaio cometa
Issue Date:	30-Jun-2015
Abstract:	A utilização de células-tronco em terapias vem crescendo exponencialmente nos últimos anos devido suas características de auto-renovação. No entanto, estudos relatam que com o envelhecimento estas células podem sofrer alterações nas suas funções devido ao estresse oxidativo, provocado pelo acúmulo de espécies reativas de oxigênio (EROS), e desencadear efeitos genotóxicos severos. Com o intuito de contribuir para identificação do mecanismo do envelhecimento, em células-tronco, e permitir que estas células sejam utilizadas futuramente na prevenção e tratamento de doenças crônicas e degenerativas em idosos através do transplante autólogo, este estudo teve como objetivo avaliar os efeitos do envelhecimento sobre a produção citoplasmática de EROS, por citometria de fluxo, e consequente fragmentação no DNA, pelo ensaio cometa. Para isso, foram utilizadas células-tronco hematopoiéticas da medula óssea de camundongos de 2 e 24 meses de idade da linhagem C57BL/6 divididos em grupo jovem (n = 6) e idoso (n =4). Primeiramente as células-tronco hematopoiéticas foram isoladas pela técnica de citometria de fluxo e os níveis de ânion superóxido (•O2-) foram mensurados pela mediana da intensidade de fluorescência (MFI), após oxidação do dihidroetidio (DHE). Já para avaliação dos danos ao DNA, os cometas formados foram visualizados por microscopia de fluorescência, através da coloração com brometo de etídio, e analisados por um sistema de imagem avaliando os seguintes parâmetros: porcentagem de DNA na cauda (Tail DNA %) e o momento da cauda (Tail Moment). Os dados foram expressos como média±EPM e analisados pelo Teste t de Student. Os resultados obtidos mostraram que os animais do grupo idoso apresentaram maior produção de •O2- quando comparados aos animais do grupo jovem (Jovem: 1561 ± 138 vs. Idoso: 3089 ± 263, MFI). A análise de genotoxicidade revelou que os animais do grupo idoso apresentaram níveis maiores, dos dois parâmetros, quando comparados aos animais do grupo jovem (Jovem: 3.9 ± 0.8% vs. Idoso: 32.2 ± 2.5%, Tail DNA %) e (Jovem: 0.7 ± 0.2 vs. Idoso: 37.5 ± 2.8, Tail moment). Esses resultados sugerem que o envelhecimento aumenta a produção de EROS e consequentemente há formação de danos no DNA de células-tronco, podendo comprometer suas funções.
URI:	https://repositorio.uvv.br//handle/123456789/238
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