COLLAB UVV

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2. Teses e Dissertações
3. Ciência Animal (Dissertações)

Title:	Cultivo e caracterização in vitro de células tronco mesenquimais provenientes de ligamento largo do útero de cadelas
Authors:	Fortunato, Viviane Raposo
metadata.dc.contributor:	Monteiro, Betânia Souza
Keywords:	Fibroblastóides - Citometria - Diferenciação osteogênica - Diferenciação adipogênica - Aderência celular
Issue Date:	30-Mar-2016
Abstract:	As células-tronco mesenquimais (CTM) são consideradas uma linhagem de células tronco somáticas e estão presentes em regiões perivasculares de todos os tecidos adultos. Diferentes protocolos de coleta e expansão desse tipo celular para modelos experimentais estão disponíveis na literatura científica. Contudo, protocolos bem fundamentados para realização de cultura dessas células indiferenciadas de cães e gatos são mais difíceis de serem encontrados e reproduzidos e, ainda, utilizam-se apenas a Medula óssea e o tecido adiposo como fontes doadoras de células. O presente trabalho objetivou estabelecer um protocolo viável para a cultura de células-tronco mesenquimais de cadelas a partir de ligamento largo do útero (LLU), realizando coleta, expansão, caracterização e diferenciação celular das culturas estabelecidas. Foram coletadas aproximadamente 1,0 cm³ de LLU de 20 cadelas submetidas a ovariohisterectomia (OH) eletivas, e as amostras foram processadas em laboratório de cultivo celular. No primeiro dia de cultura visualizou-se inúmeras células com formato arredondado, suspensas em meio de cultura, não permitindo identificar o tipo celular. Ademais, as culturas começaram a apresentar células aderentes, com morfologia fibroblastóides nas primeiras 24 horas após o plaqueamento no meio DMEM completo. A caracterização fenotípica obtida pela citometria de fluxo mostrou baixa expressão de marcadores de células hematopoiéticas CD45 (3,82 %) e CD11 (2,52%) e alta expressão de marcadores de células tronco CD90 (90,30 %) e CD73 (86,82 %). A cultura em diferenciação osteogênica apresentou nódulos de mineralização a partir de 7 dias em meio osteogênico e tornando mais evidente aos 21 dias de cultivo. A diferenciação adipogênica também exibiu a formação de vacúolos de gordura a partir do 15º dia em meio de diferenciação. A associação desses dados nos permitiu inferir que as células extraídas do LLU representam uma população de células tronco mesenquimais.
URI:	https://repositorio.uvv.br//handle/123456789/666
Appears in Collections:	Ciência Animal (Dissertações)

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