COLLAB UVV

1. COLLAB UVV
2. Teses e Dissertações
3. Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas
4. Tese de Doutorado

Title:	Avaliação da atividade do extrato de suspensões de células tronco vegetal de Coffea canephora no processo de envelhecimento e regeneração da pele
Authors:	Guidoni, Marcio
metadata.dc.contributor:	Fronza, Marcio
Keywords:	Células tronco vegetal - Conilon - Envelhecimento celular - Café - Lipossoma
Issue Date:	19-Apr-2022
Abstract:	Nas últimas décadas, a cultura de células vegetais tornou-se uma promissora ferramenta para a produção de ingredientes bioativos para usos biomédicos e cosméticos, porém, o sucesso até o momento tem sido limitado. Este estudo teve como objetivo avaliar a eficácia desse processo biotecnológico para a obtenção de um extrato de células-tronco de Coffea canephora bioativo (SCECC) e posterior produção do lipossoma a partir desse extrato (LSCECC) com propriedades antioxidantes, anti-inflamatórias e regenerativas. Os teores de fenólicos e flavonóides totais foram determinados no extrato SCECC por análises espectrofotométricas. A atividade antioxidante foi avaliada usando os métodos colorimétricos do sequestro do radical livre ABTS e a redução do íon férrico (FRAP). A atividade anti-inflamatória foi estudada em macrófagos RAW 264.7 estimulados por lipopolissacarídeos, investigando a produção de ânion superóxido (O2 ●-), óxido nítrico (NO), fator de necrose tumoral alfa (TNF-a), interleucina-6(IL-6), e a atividade do fator nuclear kappa B (NF-kB). Além disso, a capacidade do SCECC em estimular a proliferação e migração de fibroblastos foi avaliada pelo ensaio do scratch assay. Uma formulação lipossomal foi desenvolvida e caracterizada através da técnica de espalhamento dinâmico de luz (DLS), microscopia de força atômica (AFM) e microscopia eletrônica de transmissão (TEM). O efeito sobre o reparo tecidual em úlceras cutâneas foi avaliado em ratos wistar, que foram divididos aleatoriamente em dois grupos de 20 animais. Úlceras de 150 mm de diâmetro foram criadas na região posterior de cada animal, e tratadas diariamente com LSCECC (controle positivo) e controle. Após 2, 7, 14 e 21 dias do ferimento, cinco ratos de cada grupo foram sacrificados e a redução da área da lesão e reepitelização foram avaliadas. Biópsias das feridas foram coletadas para posterior análise histológica e bioquímica. Alto conteúdo fenólico e atividade antioxidante foram observados no extrato de SCECC. In vitro, o SCECC promoveu a proliferação e migração de fibroblastos e suprimiu os mediadores pró-inflamatórios O2●-, NO, TNF-a e IL-6 de forma dose-dependente. Além disso, o SCECC foi capaz de inibir o fator de transcrição NF-kB. In vivo, o uso do LSCECC resultou em uma reepitelização mais rápida, exibindo uma redução significativa na área da ferida de 36,4, 42,4 e 87,4% após 7, 10 e 14 dias após produção das feridas, respectivamente, comparado ao grupo controle. As análises histológicas e bioquímicas das biópsias das lesões demostraram que as feridas tratadas com LSCECC exibiram um aumento no tecido granular e uma resposta inflamatória regulada pela modulação da liberação de citocinas pró-inflamatórias TNF-α, IL-6 e aumento da liberação de anti-inflamatória IL-10. Além disso, as feridas tratadas com LSCECC exibiram um aumento acentuado na deposição e organização das fibras de colágeno no local da ferida e melhorou a qualidade do tecido cicatricial devido ao aumento de TGF-β e VEGF. Em geral, os resultados revelaram que o extrato de células-tronco de C. canephora possui efeito modulador no processo de regeneração de tecidos e pode ser benéfico para o desenvolvimento de produtos cosméticos.
URI:	https://repositorio.uvv.br//handle/123456789/2001
Appears in Collections:	Tese de Doutorado

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