Análise da viabilidade celular utilizando software livre e microscopia de luz: uma metodologia alternativa, reprodutível e de custo reduzido

Abstract

A análise de viabilidade celular tem desenvolvido substancialmente com a evolução de bioengenharia.Normalmente, estas análises são realizadas pela técnica de citometria de fluxo, que necessitam de equipamentos de custo elevado no mercado. O objetivo deste estudo foi avaliar a eficiência da utilização de microscopia de luz, corantes não específicos e software livre quando comparados àcitometria de fluxo. Foi avaliada a viabilidade celular da linhagem Hepa 1c1c7 frente à ação do hipoclorito de sódio, peróxido de hidrogênio em três concentrações diferentes. As células foram coradas com Giemsae Azul de Tripan, em lâminas. As imagens foram registradas pelo microscópio invertido acoplado a câmera de 3,0MP, identificadas usando software Cellprofiler e diferenciadas pelos CellprofilerAnalyst. Análise estatística empregada foi teste t-student, com grau de confiança p<0,05.A especificidade entre as análises variou de 0,83 +0,03 a 0,99+0,01 e sensibilidade média de 0,81+0,02 a 0,99+0,01. A correlação entre os métodos foi de r2=0,99. Conclui-se, que o método de análise de imagem apresenta neste trabalho confiabilidade semelhante ao de citometria.