COLLAB UVV

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Título:	Determinação dos níveis de espécies reativas de oxigênio em leucócitos de pacientes com doença pulmonar obstrutiva crônica no Estado do Espírito Santo
Autor(es):	Bulian, Carla Cristiana de Castro
Orientador(es):	Campagnaro, Bianca Prandi
Palavras-chave:	DPOC - Estresse oxidativo - Espécies reativas de oxigênio - Citometria de fluxo
Data do documento:	20-Nov-2014
Resumo:	As espécies reativas de oxigênio são produzidas por uma fonte endógena (mitocôndrias), de forma contínua e fisiológica. Sua produção pode ser aumentada, a partir de estímulos exógenos, desequilibrando os mecanismos de defesa antioxidante do organismo, levando a um estresse oxidativo que estímula a liberação de mediadores inflamatórios lesando as células. Na doença pulmonar obstrutiva crônica, ocorre a formação de espécies reativas de oxigênio em excesso, levando a uma resposta inflamatória anormal devido à inalação de partículas ou gases tóxicos, principalmente o tabaco, que culmina na obstrução progressiva das vias aéreas, resultando na limitação ao fluxo aéreo, necessitando do uso de medicações inalatórias para tratamento. Nestes pacientes, tem sido feito estudos para medir as espécies reativas de oxigênio principalmente através da marcação de óxido nítrico e peróxido de hidrogênio exalados, e a identificação de enzimas antioxidantes no plasma, escarro, e lavado broncoalveolar. Por isso, este trabalho tem como objetivo, a avaliação da produção das espécies reativas de oxigênio pelos leucócitos dos pacientes portadores de doença pulmonar obstrutiva crônica, que fazem uso de medicações inalatórias, principalmente corticoide inalatório, através da citometria de fluxo. Foram selecionados e contatados por telefone 45 pacientes ex tabagistas, com idade variando de 45 a 80 anos, após realizarem espirometria foram divididos em 11 pacientes do grupo Controle, sem uso de medicações inalatórias. 8 pacientes do grupo DPOC II, em uso de Formoterol. 12 pacientes do grupo DPOC III, em uso de Formoterol e Brometo de Tiotrópio e 14 pacientes do grupo DPOC IV, em uso de Salmeterol + Fluticasona e Brometo de Tiotrópio. Após assinarem um termo de consentimento livre e esclarecido, foram coletadas 5 ml de sangue e levados para o Laboratório de Fisiologia Translacional da Universidade Federal do Espírito Santo. Para análise do estresse oxidativo, ). Para análise do estresse oxidativo 106 células foram diluídas em solução salina de fosfato tamponada e incubadas com 160μM de DHE e 20mM de DCFH-DA, por 30 minutos, 2μM DAF-2DA, por 180 minutos, 5μM HPF, por 15 minutos, todos a 37ºC no escuro e, depois lavadas e ressuspendidas em 0,5ml de PBSiFBS. Em cada experimento foi avaliado 10000 células. Os dados estão expressos como média±EPM e a análise estatística usada foi ANOVA de uma via, seguida pelo post hoc de Tuckey. A análise mostrou que nos pacientes dos grupos DPOCII, DPOCIII e DPOCIV, houve uma maior produção de ânions superóxido quando comparados ao grupo Controle (Controle: 3218±1,88; DPOC II: 5156±242; DPOC III: 6470±241; DPOC IV: 5223±151, a.u). A produção de óxido nítrico foi menor no grupo DPOC IV (1889±70, a.u), em comparação com todos os outros grupos. A produção de peróxido de hidrogênio foi menor no grupo DPOC IV (4825±233, a.u), em comparação com o grupo DPOC III (6524±691,a.u), porém foi maior que o grupo Controle (3034±98, a.u). A produção de radical hidroxila e peroxinitrito do grupo DPOC IV (1384±57, a.u) apresentaram menor produção em comparação com os do grupo DPOC III (2289±43, a.u), sendo que esta diminuição se mostrou quase igual a do grupo DPOC II (1315±43, a.u), porém maior que a do grupo Controle (771±20, a.u). Nossos resultados sugerem que portadores de doença pulmonar obstrutiva crônica apresentam um aumento das espécies reativas de oxigênio quando comparados com o grupo controle e que pacientes do grupo DPOC IV apresentam uma diminuição desta produção em comparação com o grupo DPOC III, que pode ser explicada pelo uso de corticoide inalatório e que o uso da citometria de fluxo para avaliação de espécies reativas de oxigênio em pacientes portadores de doença pulmonar obstrutiva crônica pode auxiliar o monitoramento da doença.
URI:	https://repositorio.uvv.br//handle/123456789/812
Aparece nas coleções:	Ciências Farmacêuticas (Dissertações)

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